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中和试验(Neutralization test)

中和试验

应用中和试验

“噬菌斑减少中和试验用于量化病毒中和抗体的滴度。

将待测抗体的血清样本或溶液稀释并与病毒悬浮液混合。



中和试验( NT)是噬菌斑测定的一种变体,可用于检测 患者或疫苗接种者血清中针对某些病毒的中和抗体。

原理

通过将抗体结合到病毒表面,可以防止其被细胞吸收,从而使其无法再繁殖,并且细胞培养物中噬菌斑的数量也会减少。因此,

中和试验也称为空斑减少试验。中和抗体是可以阻止病毒进入细胞的抗体。根据浓度的不同,所有与细胞结合的位点都会被中和

抗体阻断。中和试验中仅检测到中和抗体。对多种病毒株具有活性的中和抗体称为广泛中和抗体,例如 B.广泛中和抗HIV抗体或

广泛中和抗IAV抗体,也可以在中和试验中测定。

中和试验还可用于测定形成功能性抑制抗体的 细胞毒素(包括不同来源的各种毒素)的浓度。


Ablauf

将已知量的病毒粒子添加到细胞培养物中。由于病毒的细胞病变作用而发生细胞破坏。在进一步的方法中,将病毒和患者血清

或其稀释液添加到细胞培养物中。如果血清中存在足够的针对该病毒的中和抗体,则细胞病变效应就会减弱,并且培养物的细胞保持完整。

与噬菌斑测定一样,在细胞培养物中对细胞苔的分离区域进行计数。测定抗体滴度患者血清在不同培养物中越来越稀释(1:2、1:4、1:8 等)。

保留超过 50% 的细胞层的最后稀释度称为滴度。


在日常医疗中的重要性

中和测试是一个非常复杂且耗时的过程,因为细胞培养需要设备,并且测试通常持续数天。此外,由于使用的是原生病毒,对于病原病毒来说,

对实验室的安全水平提出了更高的要求。同样,细胞培养比使用现成的测试套件需要更多的劳动力和经验。


然而,没有任何自动免疫测定可以与中和反应的特异性相匹配,这就是为什么 NT 经常被用作质量控制的参考测试。在寻找中和抗体时,

除了中和试验之外别无选择。

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中和试验:接受的斑块被包围

应用中和试验

“噬菌斑减少中和试验用于量化病毒中和抗体的滴度。

将待测抗体的血清样本或溶液稀释并与病毒悬浮液混合。”

 https://en.wikipedia.org/wiki/Plaque_reduction_neutralization_test ]

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