ELISPOT技术在抗肿瘤疫苗研究中的应用

        1、在肿瘤疫苗治疗前后 ,如何准确的定量、定性判定肿瘤抗原特异性T细胞反应 ,评价疗效 ,是影响抗肿瘤疫苗发展的关键。ELISPOT法是近年来逐渐

建立起来的一种通过检测细胞因子评价T淋巴细胞功能和特异性的新方法。它能够对T淋巴细胞直接进行检测 ,不需要体外扩增 ,特异性、敏感性都有

所提高。经过可行性分析和多中心对比研究 ,该技术不仅可用于监测肿瘤疫苗的疗效 ,也能用来鉴定肿瘤抗原表位。很有可能在完成的与其他方法的

比较后ELISPOT将会成为定量分析肿瘤或病毒特异性的T细胞反应的首选。

        2、癌症的发生与发展是机体细胞免疫机能减弱的结果，增强机体针对癌细胞的特异性细胞免疫反应是癌症治疗的重要措施之一。在介导肿瘤免疫

治疗中，T细胞被公认具有举足轻重的地位。ELISpot和FluoroSpot技术可以检测肿瘤抗原特异性T细胞的诱导，并通过检测细胞毒性T细胞释放的颗

粒酶B或穿孔素来表征细胞介导的细胞毒性机制。ELISpot和FluoroSpot技术通常可用于评估癌症疫苗的功效，也可用于鉴定特定的肿瘤抗原。在癌症

研究中使用ELISpot不仅可以评估T细胞，也可评估B细胞用于监测癌症疫苗诱导的抗体反应的质量和持续时间。多发性骨髓瘤治疗后的高复发率仍然是

一个未解决的问题。免疫疗法，尤其是CAR-T疗法，由于其非交叉耐药机制，被认为是治疗这种恶性肿瘤的最有希望的策略。然而，即使在CAR-T治疗

后，患者最终也会复发。因此，针对不同靶点的联合治疗可能是一种合理的策略。一些研究在使用自然杀伤细胞、细胞毒性T淋巴细胞和T细胞受体转

基因T（TCR-T）细胞联合治疗骨髓瘤方面取得了突破。通过人IFN-γ ELISpot 实验鉴定出AKAP4中最强的CTL表位，该表位可用于开发癌症疫苗或T细胞

受体转基因T细胞（TCR-T）以杀死骨髓瘤细胞

慢性炎症促进髓系抑制细胞活化，阻断转基因小鼠黑色素瘤模型中的抗肿瘤免疫

Toll 样受体激动剂 rMBP-NAP 增强肺癌患者外周血单核细胞的抗肿瘤细胞因子产生和 CTL 活性

Lack of anti-tumour reactivity despite enhanced numbers of circulating natural killer T cells in two patients with metastatic renal cell carcinoma.